Existem três hospedeiros de expressão de Escherichia coli, levedura e Streptomyces. A seguir está o processo de desenvolvimento da expressão de proteínas em Escherichia coli.
1. Selecione promotores, tags e vetores (promotores, tags, vetores)
O pessoal principal de P&D tem muitos anos de experiência em biocatálise, biologia estrutural e evolução dirigida, e publicou artigos em periódicos conhecidos como PNAS, PLoS Pathogens, FEBS J, JMB, JAFC, Biotechnology for Biofuels, etc. Integramos design (semi-) racional, evolução dirigida, fusão multienzimática e outros métodos de engenharia enzimática para alterar o nível de expressão, estabilidade térmica, especificidade do substrato e eficiência catalítica das enzimas. Atualmente, tem sido aplicado em muitos projetos para substâncias como fator de coenzima, glicosídeo de esteviol RD e psicose.
Durante in vitro catálise enzimática, desenvolvemos de forma independente uma variedade de resinas de purificação e resinas imobilizadas adequadas para produção em massa. Os grupos comuns incluem NTA, IDA, epóxi, amino e grupos compostos. Diferentes substratos de resina também podem ser selecionados de acordo com as propriedades da proteína e as condições de reação.
Se substratos e produtos podem entrar e sair das células livremente e não são facilmente degradados por enzimas híbridas, a catálise de células inteiras costuma ser a melhor escolha.
Com base na experiência madura, o processo de otimização das condições de reação, incluindo pH da reação, temperatura de reação, íons metálicos, concentração de substrato, quantidade de enzima, tempo de reação, preservação e aplicação de células inteiras/enzimas, pode ser concluído em cerca de 1-3 meses.
Durante in vitro catálise enzimática, desenvolvemos de forma independente uma variedade de resinas de purificação e resinas imobilizadas adequadas para produção em massa. Os grupos comuns incluem NTA, IDA, epóxi, amino e grupos compostos. Diferentes substratos de resina também podem ser selecionados de acordo com as propriedades da proteína e as condições de reação.
Se substratos e produtos podem entrar e sair das células livremente e não são facilmente degradados por enzimas híbridas, a catálise de células inteiras costuma ser a melhor escolha.