Znanstvena metoda za količinsko opredelitev NMN v bioloških vzorcih
1. Uvod
Dopolnitevnikotinamid mononukleotid (NMN)za zvišanje ravni nikotinamid adenin dinukleotida (NAD +) je bilo razkrito kot obetavna intervencija proti staranju. Vendar pa je še vedno resen izziv natančno količinsko opredeliti vmesne izdelke NAD +,NMNzlasti. Ta študija lahko uvede novo metodo, metodologijo LC-MS/MS, ki jo posredujejo dvojni izotopi (dimeLC-MS/MS), za natančno kvantifikacijoNMNv bioloških vzorcih.
2. Dejavniki, ki vplivajo na natančno odkrivanje NMN
NMN je težko natančno zaznati zaradi njegove ranljivosti za encimsko razgradnjo, pretvorbo pri obdelavi vzorcev, kompleksnega vedenja v različnih pogojih kolone in ekstrakcije ter učinka matriksa.
Natančneje, NMN ima lastnosti visoke polarnosti in nizke hlapnosti, ki se zlahka raztopi v vodi, vendar se težko raztopi v organskih topilih. Te lastnosti močno omejujejo uporabo številnih konvencionalnih metod kvantitativne analize.
BJološki vzorcikot sokri nosi pomembne aktivnosti CD38 in CD73 (ekto-5’-nukleotidazo), ki bi lahko uporabljala NMN kot substrat.
Obnašanje NMN v koloni je zelo zapleteno, verjetno zaradi dvostranske narave njegovih nabojev, tako da subtilne razlike v pogojih ekstrakcije in kolone pomembno vplivajo na zanesljivo in natančno zaznavanje NMN.
3. Strategije obvladovanjadimeLC-MS/MSzmanjšati vpliv dejavnikov vpliva
Da bi se izognili motnjam zgoraj omenjenih dejavnikov, se uporablja prototipni stolpec NMN-2. Ta kolona vsebuje delce silicijevega dioksida visoke čistosti na osnovi C18, ki so bolj sposobni vezati hidrofilne spojine kot ogljikovi delci, kar izboljšuje sposobnost ločevanja.
Uporablja se perklorna kislina (PCA), ki lahko učinkovito ekstrahira NAD + in NMN iz bioloških vzorcev, kot je plazma, z minimalnimi izgubami.
Za prilagoditev učinkom matriksa se biološkim vzorcem pred ekstrakcijo PCA doda določena količina (1 μM) vsake izotopske spojine.
4. PrednostsdimeLC-MS/MS
Dvojni izotopski NMN standardi, NMN (M + 14) in NMN (M + 5), v metodologiji LC-MS/MS, lahko natančno sledijo usodi NMN med obdelavo vzorcev, kar bistveno poveča natančnost in zanesljivost merjenja NMN v bioloških vzorcih. Poleg tega lahko dimeLC-MS / MS oceni učinkovitost ekstrakcije in absolutne koncentracije NMN v različnih vrstah bioloških vzorcev.
5. Zaključek
ThJenovi LC-MS/MS-Metodologija z dvojnimi izotopskimi standardi NMN lahko natančno in zanesljivo meri NMN v bioloških vzorcih.Uporablja se lahko za prihodnje študije o vnosu NMN.
6. Sklic
"Absolutna kvantifikacija nikotinamid mononukleotida v bioloških vzorcih z dvojno izotopsko posredovano tekočinsko kromatografijo-tandemsko masno spektrometrijo (dimeLC-MS / MS)." npj staranje vol. 10,1 2. 2. januarja 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Zakaj izbratiBONTAC?
BONTACje vodilni na svetovni ravniNMNindustrija. Na Kitajskem imamo prvo tehnologijo katalize celotnih encimov in smo postali vodilno podjetje v koencimskih izdelkih, ki se pogosto uporabljajo v zdravstveni industriji, medicini in lepoti, zelenem kmetijstvu, biomedicini in drugih področjih. Predvsem je BONTAC NMNdobavitelj surovin znane ekipe Davida Sinclaira na Univerzi Harvard. Naše storitve in izdelki so zaupanja vredni. Poleg tegaBONTACima neodvisen raziskovalni center za tehnologijo koencimskega inženiringa na pokrajinski ravni na Kitajskem in tovarne v lasti, kjer je mogoče zagotoviti čistost in stabilnost izdelkov.
Disclaimer
ThJeČlanek jena podlagi Sklic vAkademska revija. Ustrezne informacije soZagotovitisamo za namene deljenja in učenja in ne predstavlja nobenega zdravniškega svetovanja. Če pride do kakršne koli kršitve, prosimStikAvtorzaodstranitevion. Stališča, izražena v tem članku, ne predstavljajo stališčaBONTAC.